Date published: 2026-7-11

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ANKTM1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-435491-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • ANKTM1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase ANKTM1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ANKTM1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Trpa1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
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    ANKTM1 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-435491-NIC
    20 µg
    $410.00

    O gene Trpa1 do camundongo codifica ANKTM1 (TRPA1), um canal catiônico polimodal e não seletivo da família dos receptores de potencial transitório, que integra irritantes eletrofílicos, espécies reativas de oxigênio/nitrogênio e mediadores inflamatórios para regular a excitabilidade de neurônios sensoriais. A ativação do canal promove influxo de cálcio e sinalização a jusante que molda a nocicepção, a inflamação neurogênica e respostas das vias aéreas e vasculares, vinculando o TRPA1 a processos como a detecção de estresse oxidativo e a modulação da abertura do canal por GPCRs e quinases. A atividade do TRPA1 cruza-se com vias inflamatórias por meio da liberação de mediadores e da comunicação entre neurônios e o sistema imune, influenciando fenótipos de hipersensibilidade à dor e prurido em modelos pré-clínicos. A desregulação da sinalização de TRPA1 tem sido associada a estados de dor inflamatória, mecanismos de dor neuropática, tosse e hiper-reatividade das vias aéreas semelhante à asma, e ao processamento sensorial relacionado à enxaqueca, sustentando sua ampla relevância em pesquisas de neurobiologia e imunofisiologia.

    ANKTM1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Trpa1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Trpa1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Trpa1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Trpa1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.