ANKRD22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424577

Visão geral

Ankrd22 codifica a ANKRD22, uma proteína contendo repetições de anquirina implicada em interações proteína–proteína que podem influenciar a sinalização celular e programas adaptativos ao estresse. Estudos de perfil de expressão associaram a ANKRD22 ao estado metabólico e à regulação específica por tecido, sugerindo papéis em vias que coordenam o balanço energético com sinais de crescimento e sobrevivência. Em sistemas de mamíferos, proteínas com repetições de anquirina frequentemente interagem com a degradação dependente de ubiquitina, a organização do citoesqueleto e o controle transcricional, tornando a Ankrd22 relevante para dissecar redes regulatórias dependentes do contexto. Alterações na expressão de ANKRD22 foram relatadas em conjuntos de dados associados a doenças, sustentando seu uso como um nó molecular para estudos mecanísticos de metabolismo desregulado e sinalização proliferativa in vivo e em modelos celulares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ANKRD22 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ankrd22 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ankrd22, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ankrd22 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ANKRD22.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ankrd22 para a investigação da sinalização de ANKRD22, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ankrd22 críticos para a função ANKRD22
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ankrd22 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ANKRD22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ANKRD22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ankrd22. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ANKRD22 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ANKRD22 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ankrd22 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ankrd22 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.