ANKRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417372

Visão geral

ANKRA2 (ankyrin repeat family A member 2) codifica a ANKRA, uma proteína que contém repetições de anquirina e que se acredita dar suporte a redes de interação proteína–proteína que influenciam processos de regulação gênica e de sinalização. Proteínas com repetições de anquirina comumente participam da montagem de complexos transcricionais ou associados à cromatina e podem modular a estabilidade ou a localização de componentes de vias de sinalização. Em células humanas, a ANKRA2 é estudada no contexto de programas de homeostase celular, como diferenciação e regulação responsiva ao estresse, nos quais fatores do tipo “scaffold” (andaime) ajudam a ajustar a saída das vias. Alterações na regulação de proteínas contendo repetições de anquirina têm sido amplamente associadas a descontrole da regulação transcricional e a mudanças de estado celular relevantes para a biologia de doenças, o que motiva estudos mecanísticos da função de ANKRA2.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ANKRA (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ANKRA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ANKRA2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ANKRA2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ANKRA.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ANKRA2 para a investigação da sinalização de ANKRA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ANKRA2 críticos para a função ANKRA
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ANKRA2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ANKRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ANKRA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ANKRA2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ANKRA Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ANKRA (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ANKRA2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ANKRA2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.