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Angiotensinogen双切口酶质粒(h) | sc-401013-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Angiotensinogen双切口酶质粒(h2) | sc-401013-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 AGT 基因编码血管紧张素原(angiotensinogen),它是由肝脏产生的血管紧张素肽前体,驱动肾素–血管紧张素系统(RAS)的运行。肾素与血管紧张素转换酶对其进行蛋白水解加工,生成血管紧张素 II;后者是关键效应分子,可通过 AT1/AT2 受体通路调控血管张力、钠与水稳态以及内分泌信号传导。其下游信号与钙动员、MAPK 级联、氧化应激反应以及转录程序相互交织,从而影响血管重塑与炎症过程。AGT/RAS 活性失调被广泛用于研究高血压的发生机制,以及心血管与肾脏病理生理、代谢应激和多组织中的纤维化相关信号通路。
Angiotensinogen 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AGT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AGT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AGT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AGT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。