Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419041

Panoramica

L’angiopoietina 1 (ANGPT1; Ang-1) è un fattore di crescita vascolare secreto che si lega al recettore tirosin-chinasico endoteliale TIE2/TEK, promuovendo la maturazione dei vasi, la sopravvivenza endoteliale e la stabilizzazione della barriera. Nei tessuti murini, la segnalazione di ANGPT1 coordina il reclutamento dei periciti, il rimodellamento della matrice extracellulare e le risposte anti-permeabilità, controbilanciando segnali destabilizzanti durante lo sprouting angiogenico. Questa via contribuisce alla regolazione della quiescenza vascolare e del traffico delle cellule infiammatorie modulando l’integrità delle giunzioni e i programmi di attivazione endoteliale. La disregolazione della segnalazione ANGPT1–TIE2 è stata implicata nell’angiogenesi patologica e in fenotipi di aumento della permeabilità vascolare, rilevanti per il rimodellamento del microambiente tumorale, per modelli di danno ischemico e per la ricerca sulle malattie vascolari infiammatorie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Angpt1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Angpt1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Angpt1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Angpt1 per lo studio della segnalazione di Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Angpt1 critici per la funzione di Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Angpt1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Angpt1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Angpt1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Angpt1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.