Plasmide Double Nickase (h) Angiomotin: sc-400940-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Angiomotin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Angiomotin Double Nickase (h) et le plasmide Angiomotin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AMOT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Angiomotin Antibody (B-4): sc-166924
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Angiomotin | sc-400940-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Angiomotin | sc-400940-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMOT code l’angiomotine, une protéine d’échafaudage localisée aux jonctions serrées et au cytosquelette d’actine, où elle coordonne la polarité cellulaire, l’adhérence et la migration directionnelle. L’angiomotine est un régulateur majeur de la signalisation de la voie Hippo via ses interactions avec YAP/TAZ et les complexes jonctionnels, influençant ainsi la prolifération et l’inhibition de contact. Elle contribue également au comportement angiogénique et à la morphogenèse endothéliale en modulant la dynamique du cytosquelette et des plateformes de signalisation associées à la membrane. Une expression ou une localisation dérégulée d’AMOT a été associée à une organisation tissulaire altérée et à des phénotypes migratoires pertinents pour la biologie du cancer et le remodelage vasculaire.
Angiomotin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AMOT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AMOT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AMOT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AMOT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.