ALX3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419094

概要

Alx3は、胚発生期における頭蓋顔面および前方頭部のパターニングに必要な核内調節因子である、ALX3ホメオボックス転写因子をコードします。ALX3は、神経堤細胞の規定、間葉系分化、ならびに頭蓋顔面構造を形成する形態形成過程を制御する遺伝子発現プログラムに影響を与えます。DNA結合性のホメオドメインを介して、ALX3は発生シグナルからの入力を統合し、系譜制限された転写ネットワークを協調的に制御します。ALXファミリー活性の異常は先天性の頭蓋顔面異常と関連づけられており、Alx3は発生における遺伝子制御機構の解明に向けた研究対象として重要です。

ALX3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAlx3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Alx3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Alx3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ALX3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ALX3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Alx3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ALX3の機能に不可欠なAlx3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Alx3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ALX3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびALX3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Alx3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ALX3 HDRプラスミド（m）および ALX3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAlx3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAlx3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。