ALR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403367-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ALR (h) e o Plasmídeo Double Nickase ALR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GFER. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ALR Anticorpo (E-7): sc-365885
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GFER humano codifica o augmenter of liver regeneration (ALR), uma oxidase de sulfidrilo que se localiza principalmente no espaço intermembranar mitocondrial e dá suporte ao dobramento oxidativo de proteínas por meio do sistema de retransmissão de dissulfetos MIA40–GFER. Ao promover a importação e a maturação de proteínas mitocondriais ricas em cisteína, o ALR contribui para a manutenção da cadeia respiratória, a homeostase redox e a integridade mitocondrial, influenciando o metabolismo energético e as respostas ao estresse. A atividade de GFER se cruza com a regulação da apoptose e a proliferação celular por meio da sinalização mitocondrial e do manejo de espécies reativas de oxigênio. A desregulação de ALR/GFER tem sido associada a fenótipos de disfunção mitocondrial e é frequentemente investigada em contextos de biologia hepática, neurodesenvolvimento e distúrbios associados a proteostase prejudicada e desequilíbrio redox.
ALR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GFER em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GFER. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GFER. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GFER interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.