ALR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403367
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ALR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ALR Anticorpo (E-7): sc-365885
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403367 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O GFER humano codifica o augmenter of liver regeneration (ALR), uma oxidase de sulfidrilos dependente de FAD, localizada principalmente no espaço intermembranar mitocondrial, que dá suporte ao dobramento oxidativo de proteínas e à biogênese mitocondrial. O ALR atua no sistema de retransmissão de dissulfetos MIA40/ERV1 (CHCHD4/GFER) para importar e maturar proteínas ricas em cisteína, influenciando assim a integridade da cadeia respiratória, a homeostase redox e programas celulares de sobrevivência. Por meio dessas funções, o ALR impacta processos como metabolismo energético, manejo de espécies reativas de oxigênio e respostas ao estresse, frequentemente alterados na disfunção metabólica e na remodelação mitocondrial associada a tumores. A desregulação de GFER/ALR tem sido associada a fenótipos de doenças mitocondriais e a patologias mais amplas ligadas à importação proteica deficiente e à capacidade reduzida de dobramento oxidativo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ALR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GFER em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GFER, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GFER na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ALR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GFER para a investigação da sinalização de ALR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GFER críticos para a função ALR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GFER para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ALR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ALR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GFER. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ALR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ALR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GFER para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GFER definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.