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alpha Synuclein双切口酶质粒(h) | sc-417273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
alpha Synuclein双切口酶质粒(h2) | sc-417273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 SNCA 基因编码 α-突触核蛋白(alpha Synuclein),这是一种突触前蛋白,在神经元中调控突触小泡运输、神经递质释放以及与膜脂的相互作用。它参与覆盖泛素–蛋白酶体与自噬–溶酶体通路的蛋白质稳态(proteostasis)网络,其构象动态会影响寡聚化与聚集行为。α-突触核蛋白生物学的失衡与路易小体病理密切相关,并与突触功能障碍、线粒体应激和神经炎症等神经退行性机制紧密相连。这些特征使 SNCA 成为研究神经元稳态、蛋白聚集通路以及细胞与分子神经科学模型中基因型到表型关系的核心靶点。
alpha Synuclein 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SNCA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SNCA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SNCA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SNCA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。