Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Alix Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400350-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AlixO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Alix (h) e o Plasmídeo Double Nickase Alix (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PDCD6IP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Alix Anticorpo (1A12): sc-53540
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Alix Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400350-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Alix Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400350-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PDCD6IP codifica a Alix, uma proteína adaptadora associada ao ESCRT que coordena eventos de remodelação de membranas, incluindo a biogênese de corpos multivesiculares, a triagem de carga endossomal e a biogênese de exossomos. A Alix interage com componentes do ESCRT-I/III e com parceiros como TSG101 e CHMP4 para sustentar a abscisão citocinética, o reparo da membrana plasmática e a downregulation (redução) de receptores, vinculando-a a desfechos de sinalização de fatores de crescimento e do sistema imune. Por seus papéis no tráfego endolisossomal e em processos de brotamento, a Alix é frequentemente estudada no contexto do egresso viral, da dinâmica de membranas relacionada à autofagia e da homeostase neuronal. A desregulação do tráfego dependente de PDCD6IP tem sido associada a alterações na sinalização por vesículas extracelulares e em vias de proteostase relevantes para a biologia do câncer, neurodegeneração e estados inflamatórios.
Alix O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PDCD6IP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PDCD6IP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PDCD6IP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PDCD6IP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.