Date published: 2026-7-12

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AKAP 9双切口酶质粒(h2): sc-405430-NIC-2

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • AKAP 9 双切口酶质粒(h2)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • AKAP 9双切酶质粒(h2)和AKAP 9双切酶质粒(h22)编码针对AKAP9的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:AKAP 9: sc-517030,通过WB, IF或者IHC分析
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    AKAP 9双切口酶质粒(h2)

    sc-405430-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    人类AKAP9(A-kinase anchoring protein 9,蛋白激酶A锚定蛋白9)是一种大型支架蛋白,可在高尔基体、中心体以及微管组织中心对PKA及其他信号酶进行空间组织,从而将cAMP依赖性信号与细胞骨架动力学协调起来;它参与微管成核与纺锤体组装,维持高尔基体结构完整性,并通过区室化的激酶/磷酸酶活性帮助调控细胞周期进程与细胞极性;AKAP9的失调及结构改变与基因组不稳定性和致癌性重排相关,同时在信号微域受扰的情境下也被用于研究心脏兴奋性和神经发育表型;对AKAP9进行基因编辑可用于机制层面探究亚细胞信号支架、中心体与高尔基体生物学,以及在增殖性与兴奋性组织模型中的基因型—表型关系。

    AKAP 9 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AKAP9 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AKAP9内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AKAP9的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AKAP9基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。