AIRE-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401225-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AIRE-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AIRE-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AIRE-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AIRE. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AIRE-1 Anticorpo (C-2): sc-373703
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AIRE-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401225-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AIRE-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401225-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AIRE (regulador autoimune) codifica o regulador transcricional AIRE-1, um fator-chave da tolerância imunológica central em células epiteliais tímicas medulares. O AIRE-1 promove a expressão ectópica de antígenos restritos a tecidos e sustenta a seleção negativa e o desenvolvimento de células T reguladoras por meio de processos transcricionais e associados à cromatina que moldam a apresentação de antígenos no timo. A disfunção de AIRE perturba vias de tolerância e está fortemente ligada a fenótipos autoimunes, incluindo síndromes poliglandulares autoimunes e uma desregulação imune mais ampla. Essas funções tornam o AIRE um alvo valioso para investigar o controle transcricional da tolerância imunológica, redes de apresentação de antígenos e a regulação epigenética associada ao timo.
AIRE-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AIRE em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AIRE. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AIRE. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AIRE interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.