AGTPBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405311-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AGTPBP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AGTPBP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AGTPBP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AGTPBP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AGTPBP1 Anticorpo (LM-1A7): sc-134251
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AGTPBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405311-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AGTPBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405311-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGTPBP1 codifica a carboxipeptidase citosólica 1 (CCP1), uma desglutamilase que remove/encurta cadeias laterais de poliglutamato na tubulina e noutros substratos, regulando a estabilidade dos microtúbulos e o transporte dependente de motores. Ao controlar modificações pós-traducionais da tubulina, a AGTPBP1 influencia a organização do citoesqueleto, a manutenção dos prolongamentos neuronais e vias de tráfego associadas aos cílios. A disrupção da atividade de AGTPBP1 perturba dinâmicas dependentes de microtúbulos e pode comprometer a proteostase e a distribuição de organelos em células diferenciadas. Alterações genéticas em AGTPBP1 estão associadas a fenótipos de neurodesenvolvimento e neurodegeneração, sustentando a sua utilidade como alvo para estudar a integridade neuronal e a regulação do citoesqueleto.
AGTPBP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AGTPBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AGTPBP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AGTPBP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AGTPBP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.