Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
aggrecan Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419039
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- aggrecan O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico aggrecan, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
aggrecan Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419039 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acan codifica a agrecano, um importante proteoglicano de sulfato de condroitina da matriz extracelular da cartilagem, que confere resistência à compressão ao formar grandes agregados com hialuronano e proteínas de ligação. A síntese, a secreção e a montagem do agrecano na matriz são centrais para a diferenciação dos condrócitos e a maturação da placa de crescimento, integrando-se a programas de homeostase da cartilagem influenciados pela sinalização de TGF-β, BMP e citocinas inflamatórias. A clivagem proteolítica do agrecano por agrecanases ADAMTS e por metaloproteinases de matriz contribui para a remodelação da matriz extracelular e para a perda da integridade da cartilagem. A desregulação do turnover do agrecano e a redução da expressão de Acan estão implicadas em fenótipos de displasia esquelética e em processos degenerativos articulares, tornando Acan um alvo central para pesquisas de biologia musculoesquelética e da cartilagem em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO aggrecan (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acan em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acan, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acan na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína aggrecan.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acan para a investigação da sinalização de aggrecan, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acan críticos para a função aggrecan
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acan para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo aggrecan Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo aggrecan Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acan. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo aggrecan Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR aggrecan (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acan para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acan definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.