Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AdSS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419030
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AdSS1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico AdSS1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AdSS1 Anticorpo (G-9): sc-166401
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AdSS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419030 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Adssl1 do camundongo codifica a AdSS1, uma enzima da família adenilosuccinato sintase que sustenta a biossíntese de purinas de novo ao catalisar a formação de adenilosuccinato, uma etapa-chave na produção de AMP. Por contribuir para a homeostase de nucleotídeos, a AdSS1 ajuda a manter a síntese de DNA/RNA, a carga energética e a capacidade proliferativa, vinculando-se a programas metabólicos centrais que acoplam a função mitocondrial ao crescimento celular. A perturbação do metabolismo de purinas pode comprometer vias de replicação e de resposta ao estresse e é frequentemente associada à disfunção metabólica e a alterações no controle do ciclo celular. Como um parálogo enriquecido em músculo dentro dessa via, o Adssl1 é relevante para estudar a regulação específica por tecido do fluxo de nucleotídeos e seus impactos a jusante na bioenergética e na fisiologia celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AdSS1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adssl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adssl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adssl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AdSS1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adssl1 para a investigação da sinalização de AdSS1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adssl1 críticos para a função AdSS1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adssl1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo AdSS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo AdSS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adssl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo AdSS1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR AdSS1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adssl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adssl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.