ADM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403726

Visão geral

ADM2 (adrenomedulina 2; também conhecida como intermedina) codifica um hormônio peptídico secretado da família do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), que sinaliza por meio do CLR (CALCRL) com co-receptores RAMP para modular respostas dependentes de cAMP/PKA. A ADM2 contribui para a regulação do tônus vascular, a função de células endoteliais e de músculo liso, a homeostase hidroeletrolítica e a sinalização responsiva ao estresse na fisiologia cardiovascular e renal. Em contextos celulares, a ADM2 pode influenciar programas angiogênicos, vias ligadas ao óxido nítrico e o equilíbrio de mediadores inflamatórios, integrando sinais parácrinos/autócrinos com a sinalização de GPCR. A sinalização desregulada de ADM2 tem sido associada na literatura a disfunções cardiometabólicas e vasculares, o que a torna relevante para estudos mecanísticos em modelos de pesquisa cardiovascular, renal e imunometabólica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADM2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADM2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADM2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADM2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADM2 para a investigação da sinalização de ADM2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADM2 críticos para a função ADM2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADM2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ADM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ADM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADM2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ADM2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ADM2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADM2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADM2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.