非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406235
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Adenylate cyclase 10/ADCY10基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Adenylate cyclase 10/ADCY10: sc-515097，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406235 | 20 µg | $397.00 |
概述
ADCY10 编码腺苷酸环化酶10（可溶性腺苷酸环化酶，sAC），是一种细胞内酶，其生成环磷酸腺苷（cAMP）主要响应碳酸氢盐和钙离子信号，而非由 G 蛋白偶联受体（GPCR）激活所驱动。通过塑造 cAMP 的微区（microdomains），ADCY10 调控 PKA 与 EPAC 信号传导，进而影响线粒体功能、离子转运、精子获能以及 pH 感知相关反应等过程。由 sAC 产生的 cAMP 将代谢与酸碱稳态线索整合进磷酸化调控网络之中，从而影响转录程序和细胞应激适应。ADCY10 活性失调已在男性不育、肾脏与气道的碳酸氢盐处理，以及肿瘤相关的 cAMP 信号重编程等背景下被研究，提示其在机制性通路研究中具有重要意义。
Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中ADCY10基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对ADCY10基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏ADCY10开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Adenylate cyclase 10/ADCY10蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建ADCY10缺失的细胞模型，用于Adenylate cyclase 10/ADCY10信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Adenylate cyclase 10/ADCY10 功能至关重要的 ADCY10 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 ADCY10 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Adenylate cyclase 10/ADCY10 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 ADCY10 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Adenylate cyclase 10/ADCY10 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Adenylate cyclase 10/ADCY10 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由ADCY10同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定ADCY10靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。