Adenosine A3-R Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419016-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenosine A3-RO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenosine A3-R (m) e o Plasmídeo Double Nickase Adenosine A3-R (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adora3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenosine A3-R Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419016-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Adora3 codifica o recetor de adenosina A3 (Adenosine A3-R), um GPCR acoplado a Gi/o que deteta a adenosina extracelular e modula o cAMP intracelular, a sinalização MAPK/ERK e vias de sobrevivência associadas à PI3K. A ativação do A3-R também influencia a sinalização da fosfolipase C, a mobilização de Ca2+ e o equilíbrio entre a libertação de mediadores pró- e anti-inflamatórios em compartimentos imunitários e estromais. Em sistemas murinos, o Adora3 é frequentemente estudado no contexto de hipóxia e stress tecidular, em que a adenosina se acumula, moldando o recrutamento de leucócitos, o tónus vascular e a função de barreira. A sinalização desregulada dos recetores de adenosina tem sido associada a mecanismos de doença inflamatória, ao processamento nociceptivo e à biologia do microambiente tumoral–imunitário, tornando o Adora3 um alvo útil para dissecar vias de sinalização.
Adenosine A3-R O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adora3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adora3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adora3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adora3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.