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Adenosine A2A-R慢病毒激活颗粒(h) | sc-400807-LAC | 200 µl | $455.00 |
ADORA2A 编码人腺苷 A2A 受体(A2A-R),这是一种 G 蛋白偶联受体,主要通过 Gs 介导信号传导,提高 cAMP 水平并激活依赖 PKA 和 CREB 的转录程序。A2A-R 将细胞外腺苷信号与神经调节及免疫调控回路整合在一起,从而影响神经递质释放、突触可塑性以及炎症介质生成等过程。受体活性还与 MAPK/ERK 信号、钙稳态及细胞因子网络的调控发生交叉联系,使 ADORA2A 的表达与应激反应和组织微环境变化相关联。ADORA2A 信号失调已在神经炎症、神经退行性疾病以及肿瘤相关免疫抑制等情境中被研究,因此在人体细胞模型中进行通路绘制和机制性靶点验证时具有重要意义。
Adenosine A2A-R 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ADORA2A 表达。
Adenosine A2A-R 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ADORA2A转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Adenosine A2A-R表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ADORA2A 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。