ADAMTS-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403381

概要

ADAMTS7 は、ADAMTS ファミリーに属する分泌性メタロプロテアーゼである ADAMTS-7 をコードしており、マトリックス構成成分や関連タンパク質をプロテアーゼ分解によって処理することで細胞外マトリックスをリモデリングします。ヒト組織では、ADAMTS-7 の活性は細胞—マトリックス相互作用、血管平滑筋細胞の挙動、ならびに組織構築や炎症性リモデリングを形作るマトリックス代謝回転経路に影響を及ぼします。ADAMTS7 の発現や活性の異常は血管病変や動脈硬化関連プロセスと関連づけられており、細胞外マトリックス動態の変化は線維化や変性などの組織応答とも交差する可能性があります。これらの特性により、ADAMTS-7 は細胞ベースおよび機構解明モデルにおいて、細胞外プロテオスタシス、マトリックスシグナル伝達、ならびに疾患関連のリモデリング表現型を研究するための有用な標的となります。

ADAMTS-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADAMTS7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADAMTS7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADAMTS7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAMTS-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAMTS-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADAMTS7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAMTS-7の機能に不可欠なADAMTS7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADAMTS7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAMTS-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびADAMTS-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADAMTS7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAMTS-7 HDRプラスミド（h）および ADAMTS-7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADAMTS7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADAMTS7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。