ACTA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400005-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTA1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACTA1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACTA1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACTA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α-Actin Anticorpo (733H2P): sc-517660
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400005-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACTA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400005-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACTA1 codifica a actina alfa do músculo esquelético, um componente importante do filamento fino sarcomérico que polimeriza em F-actina para sustentar a montagem das miofibrilas, a geração de força e a mecanotransdução. A dinâmica de actina dirigida por ACTA1 interage com o ciclo de pontes cruzadas actina–miosina, a organização do disco Z e vias de remodelação do citoesqueleto que regulam a estrutura das fibras musculares e o desempenho contrátil. Variações patogénicas ou expressão desregulada de ACTA1 estão associadas a doenças hereditárias do músculo esquelético, incluindo miopatias congénitas, nas quais a estabilidade alterada dos filamentos e a mecânica contrátil contribuem para disfunção celular. Como marcador e nó funcional na biologia muscular, ACTA1 é amplamente estudado em modelos de miogénese, biogénese do sarcómero e respostas ao stress do citoesqueleto.
ACTA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACTA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACTA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACTA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACTA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.