Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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ACSVL6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405327
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACSVL6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACSVL6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACSVL6 Anticorpo (C-8): sc-377374
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACSVL6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405327 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC27A5 codifica o membro 6 da família das acil-CoA sintetases de cadeia muito longa humana (ACSVL6), uma enzima que ativa ácidos gordos de cadeia longa ao convertê-los em tioésteres de acil-CoA. Esta reação sustenta a captação de lípidos e o tráfego intracelular para a β-oxidação mitocondrial e peroxissomal, ao mesmo tempo que fornece substratos de acil-CoA para a remodelação lipídica relacionada com triglicéridos, fosfolípidos e ácidos biliares. Através destas funções, a ACSVL6 contribui para a homeostase metabólica e cruza-se com vias que controlam o equilíbrio energético, a composição das membranas e a sinalização lipídica. A ativação alterada de ácidos gordos e o fluxo lipídico a jusante são frequentemente implicados em disfunção metabólica e fenótipos associados ao fígado, tornando o SLC27A5 um alvo útil para estudos mecanísticos do metabolismo lipídico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACSVL6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC27A5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC27A5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC27A5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACSVL6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC27A5 para a investigação da sinalização de ACSVL6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC27A5 críticos para a função ACSVL6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC27A5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACSVL6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ACSVL6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC27A5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACSVL6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ACSVL6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC27A5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC27A5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.