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ACSVL1双切口酶质粒(m) | sc-424084-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc27a2 编码超长链脂酰辅酶A合成酶1(ACSVL1),这是一种与内质网和过氧化物酶体相关的酶,负责将长链及超长链脂肪酸活化为其脂酰‑CoA 硫酯。该反应是脂质利用途径的关键入口,将脂肪酸摄取与β‑氧化、脂质重塑和能量稳态连接起来,并支持过氧化物酶体与线粒体之间的代谢协调。在小鼠细胞中,ACSVL1 的活性会影响细胞内生物活性脂质库,这些脂质可调控 PPAR 信号及更广泛的代谢相关转录程序。超长链脂肪酸处理失调与脂肪肝、胰岛素抵抗以及神经‑代谢表型等研究密切相关,在这些研究中常会从机制上探究脂质堆积与氧化应激。
ACSVL1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Slc27a2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Slc27a2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Slc27a2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Slc27a2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。