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ACOX1双切口酶质粒(h) | sc-401690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACOX1双切口酶质粒(h2) | sc-401690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACOX1 编码酰基辅酶A氧化酶1(acyl-CoA oxidase 1),这是过氧化物酶体中催化超长链脂肪酸β-氧化第一步的限速酶,并以过氧化氢作为副产物生成。通过参与过氧化物酶体脂质分解代谢,ACOX1 有助于维持细胞脂质稳态,并与氧化还原调控及代谢信号通路发生交互。ACOX1 活性改变与过氧化物酶体功能障碍相关表型有关,包括超长链脂肪酸的积累以及对线粒体代谢的继发性影响。涉及 ACOX1 的过氧化物酶体β-氧化失调与氧化应激通路,和神经发育、肝脏代谢及炎症反应等研究领域密切相关。
ACOX1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ACOX1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ACOX1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ACOX1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ACOX1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。