Plásmido Doble Nickase (h) ABHD5: sc-402273-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ABHD5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ABHD5 (h) y el plásmido de doble nickasa ABHD5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ABHD5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ABHD5 Anticuerpo (E-1): sc-376931
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ABHD5 | sc-402273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ABHD5 | sc-402273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD5 (también conocido como CGI-58) codifica un coactivador asociado a las gotas lipídicas que estimula la lipasa de triglicéridos del tejido adiposo (PNPLA2/ATGL) y promueve la hidrólisis intracelular de triglicéridos. Mediante la regulación de la lipólisis, la movilización de ácidos grasos y la dinámica de las gotas lipídicas, ABHD5 influye en la homeostasis energética y en señales posteriores vinculadas a la β-oxidación mitocondrial y a las respuestas de estrés celular. La alteración del catabolismo lipídico dependiente de ABHD5 se asocia con fenotipos de almacenamiento de lípidos neutros y se ha implicado en una desregulación metabólica que afecta a tejidos hepáticos, cutáneos y musculares. Como nodo central del metabolismo lipídico, ABHD5 se estudia con frecuencia en el contexto de trastornos de almacenamiento de lípidos, vías metabólicas ligadas a la inflamación y la remodelación de gotas lipídicas específica de cada tipo celular.
ABHD5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ABHD5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ABHD5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ABHD5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ABHD5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.