ABCA7 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403762-ACT

ABCA7（ATP結合カセット（ABC）トランスポーターAサブファミリー・メンバー7）は、ATP依存的な膜貫通輸送を介してリン脂質およびコレステロールの恒常性維持に関与するヒトの脂質トランスポーターである。免疫系および神経系の文脈で高発現しており、膜リモデリング、エンドサイトーシス輸送、ならびに貪食によるクリアランスを支えることで、脂質ハンドリングを自然免疫シグナル伝達や細胞ストレス応答と結び付けている。ABCA7の活性は小胞動態や脂質ラフトの組成を制御する経路と交差し、受容体シグナル伝達や抗原処理に影響を与える。遺伝学的・機能的研究により、ABCA7は神経変性疾患の感受性およびアミロイド関連プロセシングの変化と関連づけられており、ミクログリア様モデルや神経系での機構解析において重要な標的となっている。

ABCA7 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性ABCA7の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

ABCA7 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における ABCA7 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はABCA7転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性ABCA7の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のABCA7遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるABCA7依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびABCA7発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるABCA7経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。