AATK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418928
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AATK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico AATK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AATK Anticorpo (L-37): sc-100436
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AATK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418928 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Aatk codifica a tirosina-quinase associada à apoptose (AATK), uma quinase de serina/treonina enriquecida no sistema nervoso que dá suporte à diferenciação neuronal, à extensão de neuritos e às decisões de sobrevivência durante o desenvolvimento e em condições de estresse. A atividade da AATK se integra a programas de sinalização de apoptose e de fatores de crescimento, influenciando a remodelação do citoesqueleto e respostas transcricionais que moldam o destino celular. A desregulação da expressão ou da sinalização de AATK tem sido associada a alterações na maturação neuronal e a maior vulnerabilidade à degeneração, o que a torna relevante para estudos de mecanismos do neurodesenvolvimento e da biologia de doenças neurodegenerativas. Em sistemas murinos, Aatk funciona como um alvo acessível para dissecar o controle dependente de quinases da morfologia neuronal e de vias de morte celular induzida por estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AATK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aatk em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aatk, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aatk na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AATK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aatk para a investigação da sinalização de AATK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aatk críticos para a função AATK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aatk para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo AATK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo AATK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aatk. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo AATK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR AATK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aatk para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aatk definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.