Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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A-Raf Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401799-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- A-RafO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase A-Raf (h) e o Plasmídeo Double Nickase A-Raf (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARAF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:A-Raf Anticorpo (A-5): sc-166771
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
A-Raf Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401799-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A-Raf Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401799-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARAF codifica a quinase de serina/treonina A‑Raf, um membro da família RAF que conecta o RAS ativado à cascata de sinalização MAPK/ERK. Por meio de ativação regulada e dimerização, a A‑Raf contribui para a fosforilação de MEK e para o controle, a jusante, de programas de proliferação, diferenciação e sobrevivência celular. A atividade de ARAF se cruza com a sinalização de receptores de fatores de crescimento e pode influenciar a regulação por feedback dentro da via ERK e a comunicação cruzada com a sinalização PI3K–AKT. A desregulação da sinalização RAF–MEK–ERK, incluindo alterações no uso de isoformas de RAF, é amplamente relevante para redes de sinalização oncogênica e para a modelagem de dependências de via dependentes do contexto em células humanas.
A-Raf O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARAF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARAF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARAF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARAF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.