20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414520

概要

PSMA8は、20Sプロテアソームのα8サブユニットをコードしており、ユビキチン‐プロテアソーム系を介した制御されたタンパク質分解回転およびペプチド生成に寄与する、プロテアソームコアの構成要素です。プロテアソームの組み立てとタンパク質分解能を支えることで、PSMA8は細胞内プロテオスタシス、細胞周期の進行、ならびにDNA損傷シグナル伝達や抗原処理に関連するストレス適応応答に影響を与えます。プロテアソーム経路の攪乱は、主要な制御タンパク質の安定性を変化させることで、NF-κBやアポトーシスのカスケードなどのシグナル伝達ネットワークを再構築し得ます。プロテアソーム機能の破綻は、がんにおけるプロテオスタシス依存性や、タンパク質分解およびペプチド提示の変化によって生じる免疫関連表現型など、幅広い疾患生物学と関連しています。

20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPSMA8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PSMA8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PSMA8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、20S Proteasome α8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、20S Proteasome α8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PSMA8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• 20S Proteasome α8の機能に不可欠なPSMA8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PSMA8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• 20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）および20S Proteasome α8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PSMA8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  20S Proteasome α8 HDRプラスミド（h）および 20S Proteasome α8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPSMA8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPSMA8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。