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20S Proteasome α7慢病毒激活颗粒(h) | sc-401897-LAC | 200 µl | $455.00 |
PSMA7 编码 20S 蛋白酶体 α7 亚基,是 20S 核心颗粒必不可少的结构组成部分,参与蛋白酶体的装配并形成带闸门的入口通道,从而控制底物进入。通过泛素–蛋白酶体系统,α7 支持依赖 ATP 的蛋白质周转,调控细胞周期进程、信号转导、用于 MHC I 类呈递的抗原加工,以及在氧化应激或蛋白毒性应激下的蛋白质稳态。蛋白酶体组成或活性的扰动可重塑关键调控蛋白的降解过程,并影响 NF-κB 信号、DNA 损伤应答和细胞凋亡等通路。包括 PSMA7 表达变化在内的蛋白酶体稳态异常,已在多种与疾病相关、蛋白质稳态与免疫监视失衡的情境中被报道,因此可作为研究蛋白酶体生物学机制的一个关键节点。
20S Proteasome α7 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PSMA7 表达。
20S Proteasome α7 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PSMA7转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性20S Proteasome α7表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PSMA7 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。