γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-419834

概述

Crygs 编码小鼠 γS-晶状体蛋白（γS-crystallin），这是一种在眼球晶状体细胞质中含量极高的结构蛋白。它通过稳定高度致密堆积的蛋白复合体，帮助维持晶状体的透明性及其折光特性。作为 β/γ-晶状体蛋白超家族的一员，γS-晶状体蛋白在无细胞核的环境中支持长期蛋白稳态；在这种环境下，蛋白折叠改变、聚集或翻译后修饰都可能破坏晶状体的透光性。晶状体蛋白平衡的破坏与蛋白稳态（proteostasis）通路相互交织，包括伴侣蛋白辅助折叠以及影响蛋白溶解度、贯穿生命周期的应激反应。对晶状体蛋白进行遗传与生化层面的扰动，常被用于建立晶状体混浊表型模型，并研究与白内障相关的蛋白聚集机制。

γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Crygs基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Crygs基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Crygs开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使γS-crystallin蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建Crygs缺失的细胞模型，用于γS-crystallin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 γS-crystallin 功能至关重要的 Crygs 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 Crygs 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Crygs 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 γS-crystallin HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 γS-crystallin HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Crygs同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Crygs靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。