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β-2-Microglobulin双切口酶质粒(h) | sc-417704-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β-2-Microglobulin双切口酶质粒(h2) | sc-417704-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
B2M 编码 β-2-微球蛋白,它是 MHC I 类复合物的非共价组成部分,对 HLA I 类分子的正确折叠、稳定性以及在细胞表面的呈递至关重要。β-2-微球蛋白通过支持向 CD8+ T 细胞呈递肽抗原,影响抗原加工与呈递通路,并塑造免疫监视以及自我—非我识别。B2M 表达改变或功能缺失会破坏 MHC I 的转运并削弱抗原呈递;这一特征已在多种免疫逃逸情境中被观察到。这些性质使 B2M 成为在人源细胞模型中研究 HLA 依赖性信号、干扰素应答程序以及免疫—肿瘤相互作用的常用标志物与关键功能节点。
β-2-Microglobulin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 B2M 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对B2M内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏B2M的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了B2M基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。