β1-Adaptin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402948-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β1-AdaptinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase β1-Adaptin (h) e o Plasmídeo Double Nickase β1-Adaptin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AP1B1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β1-Adaptin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402948-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β1-Adaptin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402948-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AP1B1 codifica a subunidade humana β1-adaptina do complexo da proteína adaptadora 1 (AP-1), um adaptador de revestimento essencial que liga proteínas de carga à clatrina durante o brotamento de vesículas na rede trans-Golgi e em endossomos. Ao reconhecer motivos de triagem nas caudas citosólicas, o AP-1 coordena o tráfego polarizado, a reciclagem de receptores e a entrega regulada de proteínas de membrana que moldam a sinalização celular e a homeostase. O transporte dependente de β1-adaptina faz interface com vias de triagem endossomal, biogênese de lisossomos e renovação (turnover) de proteínas de membrana, que influenciam a polaridade epitelial e a função neuronal. A disfunção de AP1B1 tem sido associada a distúrbios hereditários do tráfego intracelular, incluindo fenótipos do neurodesenvolvimento e características de doença multissistêmica ligadas a defeitos na triagem de cargas.
β1-Adaptin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AP1B1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AP1B1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AP1B1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AP1B1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.