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α2B-AR双切口酶质粒(h) | sc-403430-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α2B-AR双切口酶质粒(h2) | sc-403430-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA2B 编码人源 α2B 肾上腺素能受体(α2B-AR)。它是一种与 Gi/o 蛋白偶联的 GPCR,可对儿茶酚胺作出反应,从而调节腺苷酸环化酶活性、细胞内 cAMP 水平以及下游依赖 PKA 的信号传导。受体激活还可通过 G 蛋白和 β-arrestin 机制,动员 MAPK/ERK 与 PI3K 相关通路,进而塑造包括神经递质释放、平滑肌收缩性和血管张力在内的细胞反应。在免疫与代谢情境中,α2B-AR 信号会影响应激反应相关的转录程序,并与其他神经调制受体发生串扰。关于 ADRA2B 的遗传与表达差异,已有研究将其与神经行为表型及心血管调控联系起来,支持其在解析肾上腺素能信号网络机制研究中的重要性。
α2B-AR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ADRA2B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ADRA2B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ADRA2B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ADRA2B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。