α2A-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419023-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α2A-ARO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α2A-AR (m) e o Plasmídeo Double Nickase α2A-AR (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adra2a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α2A-AR Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419023-NIC | 20 µg | $410.00 |
Adra2a codifica o receptor adrenérgico α2A de camundongo (α2A-AR), um GPCR acoplado a Gi/o que modula a liberação de neurotransmissores e o tônus simpático ao inibir a adenilil ciclase, reduzir o cAMP e ajustar a atividade de canais iônicos. A sinalização do α2A-AR influencia a regulação por feedback pré-sináptico da transmissão de catecolaminas, com efeitos a jusante sobre vias dependentes de PKA e sobre a excitabilidade neuronal. Em tecidos periféricos, esse receptor participa da regulação autonômica do tônus vascular e da homeostase metabólica por meio do controle de segundos mensageiros mediado por GPCRs. A desregulação da sinalização adrenérgica envolvendo ADRA2A tem sido estudada em fenótipos neurocomportamentais, na responsividade ao estresse e em vias associadas a traços cardiometabólicos em modelos murinos.
α2A-AR O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adra2a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adra2a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adra2a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adra2a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.