Plasmide Double Nickase (h) α Enolase: sc-400633-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α Enolase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α Enolase Double Nickase (h) et le plasmide α Enolase Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ENO1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: α Enolase Antibody (9): sc-101513
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α Enolase | sc-400633-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) α Enolase | sc-400633-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ENO1 code l’α‑énolase humaine, une enzyme bifonctionnelle qui catalyse l’étape de la glycolyse convertissant le 2‑phosphoglycérate en phosphoénolpyruvate et contribue plus largement au métabolisme énergétique cellulaire. Au‑delà de son rôle métabolique, l’α‑énolase a été impliquée dans la liaison du plasminogène à la surface cellulaire ainsi que dans des programmes de signalisation sensibles au stress qui influencent la prolifération, la migration et la survie. L’activité d’ENO1 s’inscrit dans le remodelage de la glycolyse, les voies d’adaptation à l’hypoxie et d’autres processus métaboliques fréquemment étudiés en biologie du cancer et dans les contextes inflammatoires. Une expression ou une localisation dérégulée d’ENO1 est associée à des phénotypes métaboliques altérés et a été étudiée notamment dans la progression tumorale, l’auto‑immunité et des modèles de maladies neurodégénératives.
α Enolase Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ENO1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ENO1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ENO1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ENO1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.