α Enolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420178
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α Enolase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α Enolase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α Enolase Anticorpo (9): sc-101513
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α Enolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420178 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Eno1 codifica a α-enolase, uma metaloenzima conservada que catalisa a conversão de 2-fosfoglicerato em fosfoenolpiruvato na glicólise, sustentando a geração de ATP e o fluxo de carbono sob diversas condições de nutrientes. Além de seu papel metabólico canônico, a ENO1 contribui para uma reprogramação metabólica mais ampla e pode influenciar o equilíbrio redox, a adaptação à hipóxia e as respostas ao estresse celular por meio de seu impacto no fluxo glicolítico. Alterações na expressão e na atividade de ENO1 têm sido associadas a fenótipos proliferativos e inflamatórios, e ela é frequentemente estudada em contextos em que o metabolismo energético se cruza com a sinalização oncogênica e a função de células imunes. Em sistemas murinos, Eno1 serve como um alvo acessível para dissecar mecanismos ligados à glicólise que moldam o crescimento celular, a migração e as respostas a sinais do microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α Enolase (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Eno1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Eno1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Eno1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α Enolase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Eno1 para a investigação da sinalização de α Enolase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Eno1 críticos para a função α Enolase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Eno1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α Enolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo α Enolase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Eno1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α Enolase Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR α Enolase (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Eno1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Eno1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.