Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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αB-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401149-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- αB-crystallinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase αB-crystallin (h) e o Plasmídeo Double Nickase αB-crystallin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRYAB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:αB-crystallin Anticorpo (F-10): sc-137129
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
αB-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401149-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
αB-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401149-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRYAB codifica a αB-cristalina, uma pequena proteína de choque térmico que atua como chaperona molecular independente de ATP para estabilizar proteínas parcialmente desenoveladas e limitar a agregação durante o estresse celular. Ela participa de redes de proteostase com outras HSPs e com as vias ubiquitina–proteassoma e de autofagia, além de modular a organização do citoesqueleto por meio de interações com filamentos intermediários. A αB-cristalina é altamente expressa no cristalino e é amplamente induzida em tecidos musculares e neurais sob estresse oxidativo, térmico e mecânico, relacionando-se com a sinalização de resposta ao estresse e com a regulação da apoptose. A desregulação da expressão ou da função de CRYAB tem sido associada à biologia da catarata, a fenótipos de miopatia relacionada à desmina e cardiomiopatia, e a alterações de proteostase em contextos de doenças neurodegenerativas.
αB-crystallin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRYAB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRYAB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRYAB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRYAB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.