α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403792

概要

SERPINF2は、循環性のセリンプロテアーゼ阻害因子であるヒトα-2アンチプラスミンをコードしており、プラスミンに対する主要な生理的阻害因子として線溶（フィブリン溶解）の重要な制御因子でもあります。α-2アンチプラスミンはプラスミンと安定な複合体を形成し、さらに第XIIIa因子によってフィブリンに架橋結合されることで、フィブリン血栓の分解を抑制し、凝固と細胞外プロテオリシスのバランス維持に寄与します。この作用により、SERPINF2はプラスミノーゲン活性化系、フィブリンのリモデリング、ならびにその下流に位置するマトリックス代謝回転や血管恒常性への影響と関連づけられます。SERPINF2の機能または発現の変化は、線溶能の調節異常と関連することが報告されており、出血や血栓形成の表現型に加え、プラスミン活性が重要となる炎症や組織リモデリングの状況においても研究されています。

α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSERPINF2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SERPINF2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SERPINF2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、α-2 antiplasminタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、α-2 antiplasminシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SERPINF2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• α-2 antiplasminの機能に不可欠なSERPINF2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SERPINF2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびα-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SERPINF2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  α-2 antiplasmin HDRプラスミド（h）および α-2 antiplasmin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSERPINF2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSERPINF2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。