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α1a Tubulin双切口酶质粒(h) | sc-400022-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α1a Tubulin双切口酶质粒(h2) | sc-400022-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA1A 编码 α1a 微管蛋白(tubulin),这是微管的核心组成成分。微管可聚合形成动态丝状结构,参与有丝分裂纺锤体的形成、细胞内运输以及细胞极性的维持。α1a 微管蛋白支持细胞骨架重塑及贯穿细胞周期的微管依赖性过程,从而保证染色体正确分离并促进神经元形态发生。TUBA1A 功能异常与微管动力学紊乱和大脑皮层发育异常相关,因此在神经发育障碍与细胞骨架失调研究中具有重要意义。作为人类主要的 α-微管蛋白同工型之一,它常用于研究微管的组装、稳定性,以及与微管相关蛋白和马达复合体的相互作用。
α1a Tubulin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TUBA1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TUBA1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TUBA1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TUBA1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。