RIPA Lysis Buffer System

O sistema de tampão de lise RIPA (Radio-Immunoprecipitation Assay) é amplamente utilizado no domínio da bioquímica e da biologia molecular para a lise e solubilização de células e tecidos. O tampão foi concebido para romper eficazmente as membranas celulares e solubilizar as proteínas celulares, o que o torna uma escolha ideal para a extração de proteínas para análises subsequentes, como Western blotting e imunoprecipitação. O tampão RIPA contém uma mistura de três detergentes - desoxicolato de sódio, NP-40 e SDS. Esta combinação é particularmente eficaz na solubilização de uma vasta gama de classes de proteínas, tornando-a adequada para estudos exaustivos da composição de proteínas celulares. O desoxicolato de sódio e o NP-40 são detergentes não iónicos e iónicos, respetivamente, que perturbam mais as interacções lípido-lípido e lípido-proteína, enquanto o SDS proporciona um forte ambiente aniónico que desnatura as proteínas, assegurando a sua solubilidade. A eficácia do tampão RIPA é ainda reforçada pela presença de agentes tamponantes e aditivos como o Tris, que mantém um pH consistente, e o cloreto de sódio, que proporciona uma força iónica que pode ajudar na estabilização das proteínas. Podem ser adicionados componentes opcionais como o EDTA para quelar catiões divalentes e evitar a degradação das proteínas alvo pelas proteases. Na investigação científica, o tampão RIPA é valorizado pela sua robustez e versatilidade na extração de proteínas em condições que mantêm a maioria das modificações pós-traducionais e interacções proteína-proteína. Isto torna-o uma ferramenta essencial em estudos de proteómica e outros estudos de biologia celular em que é essencial uma compreensão detalhada das interacções e funções das proteínas.

Alexa Fluor^® é uma marca comercial da Molecular Probes Inc., OR., EUA

LI-COR^® e Odyssey^® são marcas registadas da LI-COR Biosciences