Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ZWINT Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405718
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ZWINT El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ZWINT, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZWINT Anticuerpo (G-12): sc-166730
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ZWINT Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405718 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ZWINT (proteína del cinetocoro que interactúa con ZW10) es un componente conservado del cinetocoro externo que favorece una unión estable a los microtúbulos y una segregación cromosómica precisa durante la mitosis. Interactúa con el complejo ZW10/RZZ y contribuye a la señalización del punto de control del ensamblaje del huso, acoplando la dinámica cinetocoro-microtúbulo con la progresión del ciclo celular. La expresión o función alteradas de ZWINT se han asociado con inestabilidad cromosómica y fenotipos proliferativos observados en múltiples contextos de cáncer, lo que la hace relevante para estudios de aneuploidía y mantenimiento del genoma. Como regulador mitótico, ZWINT se analiza con frecuencia en vías que vinculan el control del punto de control, la arquitectura del cinetocoro y las respuestas al estrés mitótico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZWINT (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZWINT en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZWINT junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZWINT tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZWINT.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZWINT para la investigación de la señalización de ZWINT, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ZWINT críticos para la función de ZWINT
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZWINT para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ZWINT CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZWINT CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZWINT. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZWINT (h) y el plásmido HDR ZWINT (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZWINT para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZWINT definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.