Zuotin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409891-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Zuotin-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Zuotin-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Zuotin-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DNAJC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Zuotin-1 Anticorpo (A-12): sc-393426
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Zuotin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409891-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Zuotin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409891-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DNAJC2 codifica a Zuotin-1, uma proteína J-domain conservada associada aos ribossomos que atua como co-chaperona de membros da família Hsp70 e apoia o dobramento proteico cotraducional e o controle de qualidade. A Zuotin-1 participa de redes de proteostase ligadas à biogênese ribossomal, ao alongamento da tradução e à vigilância de polipeptídeos nascentes, interagindo com respostas celulares ao estresse, como a via de choque térmico. Por meio dessas funções, DNAJC2 ajuda a manter a integridade do proteoma, um processo frequentemente perturbado em distúrbios caracterizados por estresse proteotóxico e tradução desregulada. Alterações na expressão ou na função de chaperonas associadas aos ribossomos têm sido associadas à reprogramação translacional relacionada ao câncer e a vias de mau dobramento proteico relevantes para neurodegeneração, o que motiva estudos mecanísticos de DNAJC2 em células humanas.
Zuotin-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DNAJC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DNAJC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DNAJC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DNAJC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.