Plásmido Doble Nickase (h) ZnT-1: sc-403094-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZnT-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZnT-1 (h) y el plásmido de doble nickasa ZnT-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC30A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZnT-1 | sc-403094-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZnT-1 | sc-403094-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC30A1 codifica el transportador humano de zinc ZnT-1, un transportador de eflujo localizado en la membrana plasmática que limita la acumulación citosólica de Zn2+ y ayuda a mantener la homeostasis de iones metálicos. Al acoplar la exportación de zinc a las respuestas de estrés celular, ZnT-1 influye en el equilibrio redox, en programas transcripcionales sensibles a metales y en la protección frente a la citotoxicidad inducida por el zinc. Las alteraciones en la actividad de SLC30A1 se han relacionado con una señalización del zinc alterada que puede afectar la excitabilidad neuronal, la función de la barrera epitelial y la activación de células inmunitarias. La desregulación de las vías de transporte de zinc se asocia con neurodegeneración, disfunción metabólica y fenotipos inflamatorios, lo que convierte a SLC30A1 en un nodo útil para estudios mecanísticos de la biología dependiente de metales.
ZnT-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC30A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC30A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC30A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC30A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.