ZNF598 Plasmide Double Nickase (h): sc-413866-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZNF598 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZNF598 Double Nickase Plasmid (h) e il ZNF598 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZNF598. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZNF598 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413866-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZNF598 codifica una ligasi E3 dell’ubiquitina che funge da sensore ed effettore chiave del controllo qualità associato ai ribosomi, in particolare durante l’arresto della traduzione e le collisioni ribosomali. Ubiquitinando proteine della subunità ribosomale piccola, ZNF598 promuove eventi a valle che risolvono i complessi di traduzione bloccati e coordinano la sorveglianza dell’mRNA e del polipeptide nascente. Questa attività si integra con la segnalazione ubiquitina–proteasoma e con le risposte allo stress traduzionale che preservano la proteostasi in condizioni quali difetti dell’mRNA o stress ossidativo. La disregolazione delle vie di controllo qualità ribosomale è implicata nella vulnerabilità cellulare a stress proteotossici e neurodegenerativi, rendendo ZNF598 un nodo utile per studi meccanicistici sulla fedeltà della traduzione e sull’adattamento allo stress.
ZNF598 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNF598 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNF598. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNF598. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNF598 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.