Zic2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404720
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Zic2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Zic2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Zic2 Anticorpo (3C12): sc-517055
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Zic2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404720 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ZIC2 codifica o fator de transcrição de dedo de zinco Zic2, um regulador central do padrão embrionário e do desenvolvimento neural, que modula programas de expressão gênica responsáveis por controlar a especificação do destino celular, a proliferação e a diferenciação. O Zic2 atua em redes transcricionais do desenvolvimento e interage com vias de sinalização que moldam a morfogênese, incluindo vias que influenciam a formação do tubo neural e o padrãoamento da linha média do prosencéfalo. Alterações na atividade de ZIC2 estão associadas a distúrbios congênitos do neurodesenvolvimento, sobretudo a holoprosencefalia, e a expressão desregulada foi relatada em estudos de biologia tumoral e plasticidade de linhagem. Como regulador transcricional que se liga ao DNA, o Zic2 oferece um ponto de entrada mecanístico para investigar o controle enhancer–promotor, a transcrição dependente de cromatina e circuitos regulatórios gênicos do desenvolvimento em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Zic2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZIC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZIC2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZIC2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Zic2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZIC2 para a investigação da sinalização de Zic2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZIC2 críticos para a função Zic2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZIC2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Zic2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Zic2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZIC2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Zic2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Zic2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZIC2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZIC2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.