ZFYVE27 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407267-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZFYVE27O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZFYVE27 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ZFYVE27 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZFYVE27. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZFYVE27 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407267-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZFYVE27 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407267-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZFYVE27 (também conhecido como protrudina) codifica uma proteína contendo domínio FYVE que se liga ao fosfatidilinositol 3-fosfato e se associa a membranas endossomais para coordenar o tráfego de membranas. Participa do transporte de endossomos para a membrana plasmática, do crescimento de neuritos e da dinâmica vesicular dependente de microtúbulos por meio de interações com GTPases Rab, motores de cinesina e componentes de sítios de contato RE–endossomo. Ao acoplar a triagem endossomal ao transporte polarizado, o ZFYVE27 influencia vias de morfogênese neuronal e manutenção axonal. A desregulação do tráfego ligado ao ZFYVE27 tem sido associada a fenótipos neurodegenerativos, incluindo mecanismos relacionados à paraplegia espástica hereditária, tornando-o relevante para o estudo de axonopatias e defeitos no transporte intracelular.
ZFYVE27 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZFYVE27 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZFYVE27. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZFYVE27. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZFYVE27 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.