ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405072

概要

ZDHHC7はDHHCファミリーのパルミトイルトランスフェラーゼをコードしており、基質タンパク質のS-パルミトイル化を触媒します。S-パルミトイル化は可逆的な脂質修飾で、膜への会合、細胞内輸送、安定性、ならびにシグナル出力を制御します。シグナル伝達タンパク質やアダプタータンパク質のパルミトイル化依存的な局在を制御することで、ZDHHC7は受容体近傍でのシグナル伝達、小胞輸送、膜マイクロドメインの構築などの過程に影響を与えます。パルミトイル化の異常は、増殖・生存シグナルの変化、免疫細胞機能、神経生理との関連が報告されており、ZDHHC7は疾患関連の文脈で翻訳後脂質化ネットワークを研究するうえで有用なノードとなります。ZDHHC7を解析することは、ストレス下や形質転換に伴う条件において、パルミトイル化ダイナミクスが経路間クロストークやプロテオスタシスをどのように形作るかを明らかにする助けとなります。

ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZDHHC7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZDHHC7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZDHHC7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZDHHC7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZDHHC7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZDHHC7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZDHHC7の機能に不可欠なZDHHC7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZDHHC7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZDHHC7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZDHHC7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZDHHC7 HDRプラスミド（h）および ZDHHC7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZDHHC7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZDHHC7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。