ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426824

概要

Zcchc3 は、細胞質における核酸センサー機構や自然免疫シグナルの制御に関与するとされる、CCCH 型ジンクフィンガータンパク質 ZCCHC3 をコードします。報告されている機能として、RIG-I/MDA5 経路および cGAS–STING 経路に関連する応答の調節を介して、I 型インターフェロンや炎症性遺伝子プログラムの形成に影響するなど、抗ウイルス防御経路との関連が示されています。RNA/DNA によって誘導されるシグナル伝達と、その下流の転写出力に作用することで、ZCCHC3 は感染や免疫ストレスに対する細胞応答を左右し得ます。これらの過程の破綻は、マウスモデルにおける炎症性表現型や宿主—病原体相互作用の研究において重要です。

ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZcchc3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zcchc3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zcchc3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZCCHC3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZCCHC3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zcchc3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZCCHC3の機能に不可欠なZcchc3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zcchc3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZCCHC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZCCHC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zcchc3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZCCHC3 HDRプラスミド（m）および ZCCHC3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZcchc3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZcchc3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。